第二点需要注意的是,有的酶切位点,在序列中只有一个,但它上面也会标注一个*或者(dam),这说明可能这个酶切位点会有CpG岛的甲基化修饰[常见的是XbaI,TCTAG(6m)A中的TC无法切开],一般也是不能用的。但是非要用这个酶切位点的话,就需要用非甲基化的感受态细胞,如JM109或者JM110。 04 看筛选标记 (1)Ampr:水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 (2)tetr:可以阻止四环素进入细胞。 (3)camr:生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 (4) |
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